1、约翰·米勒
在片中的身份一开始并不是神父,而是一位入殓师,一个爱钱如命的酒鬼,只为负责给死去的英格曼神父化妆,才进入了教堂。但为了救助教堂里的学生,留了下来成为一名伪神父,他同时也收留了“金陵十三钗”(十四个青楼女子)。
2、玉墨
13个躲避战火的秦淮河上的风尘女子之一。当女学生们不甘被日军凌辱,准备集体自杀,被以玉墨为首的妓女们救下,成为了保护众人的英雄。
3、孟书娟
教堂中女学生之一。父亲成为汉奸,面对同伴的质疑与嘲讽时,展现出坚定的一面。她还救了秦淮河的十三位妓女,在面对日军时,即使内心十分害怕,但却不胆怯。
4、陈乔治
前教堂神父的养子,也是这群学生中唯一的男生,所以担任起保护女学生安全的责任。在最后缺少一个女生的情况下,男扮女装和玉墨一行人去了日本人的“庆功宴”。
5、李教官
是一名中国军人,也是一个枪法高超的狙击手。率领十几名士兵,拼死守护着南京城。李军官在被敌军包围并且负伤的情况下,与日本士兵同归于尽,死于炸药之下。